Tuberkulosis (TB) hingga kini masih menjadi salah satu ancaman kesehatan masyarakat global yang paling mematikan. Menurut data dalam Global Tuberculosis Report yang diterbitkan oleh World Health Organization (WHO) pada tahun 2025, diperkirakan terdapat 10,7 juta kasus baru TB di seluruh dunia, yang menempatkan penyakit ini sebagai penyebab kematian akibat infeksi tunggal tertinggi di dunia. Dalam lanskap epidemiologi ini, Indonesia menempati posisi kedua sebagai penyumbang kasus TB terbanyak secara global setelah India, dengan beban sekitar 824.000 kasus dan 93.000 kematian setiap tahunnya. Tantangan terbesar dalam memutus mata rantai penularan penyakit ini terletak pada proses diagnosis dini yang cepat dan akurat.

Buku berjudul “Pengolahan Sputum dengan Ekstrak Etanol Kulit Akar Sirgunggu untuk Optimasi Pewarnaan Bakteri Tahan Asam (BTA)” yang ditulis oleh Muji Rahayu, Bambang Supriyanta, Suyana, dan Dr. Heru Subaris Kasjono hadir sebagai sebuah literatur akademis dan praktis yang menawarkan solusi inovatif atas permasalahan diagnostik tersebut. Diterbitkan oleh Penerbit Samudra Biru pada bulan Oktober 2026, buku ini mengulas bagaimana kearifan lokal berupa pemanfaatan tanaman sirgunggu dapat diintegrasikan dengan ilmu mikrobiologi klinis untuk menyempurnakan metode pewarnaan bakteri di laboratorium.

Mengenal Tuberkulosis dan Tantangan Diagnostik Bakteri Tahan Asam

Untuk memahami urgensi dari inovasi yang ditawarkan dalam buku ini, pembaca terlebih dahulu diajak untuk menyelami karakteristik penyakit Tuberkulosis secara mendalam. TB adalah penyakit menular yang disebabkan oleh kelompok bakteri Mycobacterium tuberculosis complex (MTC), yang juga mencakup beberapa varian seperti M. bovis, M. africanum, M. microti, dan M. canettii. Bakteri ini menular melalui partikel udara berukuran sangat kecil yang disebut droplet nuclei (berukuran 1 hingga 5 mikron) yang dilepaskan ketika penderita batuk, bersin, atau berbicara. Secara morfologis, bakteri penyebab TB ini berbentuk batang lurus hingga sedikit melengkung, berukuran 1-4 mikron x 0,3-0,6 mikron, bersifat aerob obligat, dan tidak memiliki spora maupun kapsul. Ciri paling mendasar dari bakteri ini adalah dinding selnya yang sangat tebal dan didominasi oleh lipid, khususnya asam mikolat (mycolic acids), yang membuatnya mampu bertahan terhadap paparan kondisi kering serta beberapa jenis desinfektan kimia.

Patofisiologi TB dimulai ketika droplet nuclei terhirup dan berhasil mencapai alveolus paru-paru. Di sana, bakteri difagositosis oleh makrofag alveolar, namun bakteri ini memiliki kemampuan untuk bertahan hidup dengan menghambat proses penghancuran intraseluler menggunakan enzim proteolitik. Respons imun tubuh akan membentuk struktur granuloma yang mengelilingi bakteri, membuat bagian sentralnya mengalami nekrosis kaseosa (kompleks Ghon), dan mengunci bakteri dalam kondisi dorman yang dikenal sebagai TB laten. Namun, saat sistem imun melemah—akibat malnutrisi, infeksi HIV, diabetes, atau stres kronis—bakteri dapat mengalami reaktivasi, bermultiplikasi, dan memicu TB aktif yang sangat infeksius. Penderita akan menunjukkan gejala utama berupa batuk berdahak persisten selama dua minggu atau lebih, yang sering disertai gejala sistemik seperti penurunan berat badan drastis, keringat malam tanpa aktivitas, demam subfebris, dan malaise.

Tingginya angka penularan TB di Indonesia sangat dipengaruhi oleh sejumlah faktor risiko, di antaranya status gizi buruk, kepadatan hunian, riwayat kontak erat, serta kebiasaan merokok yang dapat merangsang pembentukan lendir berlebih dan menurunkan fungsi silia saluran pernapasan. Oleh karena itu, diagnosis laboratorium yang presisi menjadi ujung tombak untuk menghentikan laju infeksi. Salah satu metode lini pertama yang paling efisien, murah, dan spesifik adalah pemeriksaan mikroskopis dengan pewarnaan Ziehl-Neelsen (ZN) pada spesimen sputum (dahak).

Sputum yang memenuhi syarat untuk diagnosis harus berasal dari sekresi trakea dan bronkioli, bukan air ludah yang memiliki gelembung jernih dan sel-sel gepeng. Namun, metode pewarnaan ZN memiliki kelemahan inheren. Apabila sputum penderita sangat kental, Mycobacterium tuberculosis sering kali terperangkap kuat di dalam matriks dahak. Kondisi ini menyebabkan apusan sputum pada kaca objek menjadi tidak rata dan bakteri yang terdeteksi di bawah mikroskop bisa sangat minim (hanya berkisar satu sampai sembilan BTA dalam 100 lapang pandang), sehingga menyulitkan penegakan diagnosis yang akurat. Pada titik inilah sebuah agen mukolitik atau pengencer lendir sangat dibutuhkan untuk membebaskan bakteri dari perangkap mukus sebelum proses pewarnaan dilakukan.

Inovasi Ekstrak Sirgunggu: Dari Tradisi Gurah Menuju Optimasi Laboratorium

Buku ini menawarkan solusi cemerlang dengan mengadopsi praktik pengobatan tradisional masyarakat Imogiri, Yogyakarta, yang sejak lama menggunakan tanaman sirgunggu (Clerodendron serratum (L) Moon) untuk proses gurah (membersihkan saluran pernapasan). Ekstrak etanol dari kulit akar tanaman perdu ini secara empiris dan ilmiah terbukti memiliki khasiat sebagai agen mukolitik dan trakeospasmolitik yang mampu mengencerkan lendir dan melonggarkan jalan napas. Senyawa aktif utama yang bertanggung jawab atas bioaktivitas ini adalah golongan flavonoid (seperti 3′, 4′ dihidroksi flavonol) dan saponin.

Proses pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Akar Sirgunggu (EEKAS) diuraikan secara rinci dan sistematis dalam buku ini. Kulit akar yang telah dibersihkan, dicacah, dan dikeringkan pada suhu 40°C – 50°C digiling menjadi serbuk halus. Serbuk seberat 1000 gram ini kemudian diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan 10 Liter etanol 70% selama 3×24 jam sambil diaduk berkala. Filtrat yang dihasilkan dipisahkan dengan bantuan pompa vakum dan diuapkan menggunakan Rotary Evaporator diikuti dengan waterbath bersuhu rendah hingga menghasilkan ekstrak kental berwarna cokelat tua kehitaman. Proses standarisasi ini menghasilkan rendemen yang sangat baik, yakni sekitar 29,1% dari bobot awal.

Untuk menguji efektivitasnya, buku ini memaparkan desain riset pra-eksperimental dengan rancangan one-group posttest with control design. Sampel sputum dari penderita terduga TB dibagi menjadi tiga kelompok sama banyak: kelompok kontrol (K1) yang dibuat apusan secara langsung tanpa perlakuan, kelompok perlakuan pertama (K2) yang ditambahkan larutan EEKAS 5%, dan kelompok perlakuan kedua (K3) yang ditambahkan EEKAS 10%. Pada kelompok perlakuan, campuran sputum dan ekstrak diinkubasi selama 15 menit, disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 menit untuk mengendapkan bakteri, kemudian supernatannya dibuang dan endapannya dibuat apusan di atas kaca objek.

Semua sediaan dari ketiga kelompok tersebut kemudian diwarnai menggunakan metode tahan asam Ziehl-Neelsen (ZN). Proses pewarnaan ini memanfaatkan prinsip kimiawi ikatan ion. Apusan digenangi pewarna utama ZN A (Carbol Fuchsin) dan dipanaskan hingga menguap (tanpa mendidih) selama 3-5 menit agar lapisan lemak asam mikolat pada dinding sel Mtb terbuka dan zat warna merah dapat masuk mewarnai lapisan peptidoglikan. Setelah dingin, pori lipid menutup dan mengunci warna merah tersebut. Selanjutnya, sediaan dilunturkan dengan ZN B (asam alkohol); karena Mtb merupakan bakteri tahan asam, ia tidak akan kehilangan warna merahnya, sedangkan bakteri lain dan debris sel akan luntur. Terakhir, pewarna tandingan ZN C (Methylene Blue) diteteskan selama 20-30 detik untuk memberikan warna biru pada sel-sel selain Mtb.

Pengamatan mikroskopis dilakukan di bawah lensa objektif perbesaran 100x menggunakan minyak emersi melintasi 20 lapang pandang dengan metode pergeseran sistematis. Hasil pengujian laboratorium menunjukkan peningkatan temuan diagnostik yang luar biasa. Rerata jumlah BTA pada kelompok kontrol (K1) hanya berjumlah 137. Namun, pada kelompok dengan penambahan EEKAS 5% (K2), jumlah BTA yang ditemukan melonjak tajam menjadi 324 (meningkat sebesar 137,49%). Pada kelompok EEKAS 10% (K3), rerata BTA mencapai 344 (meningkat sebesar 151,74%).

Buku ini menyajikan analisis mendalam terkait temuan tersebut. Saponin dan flavonoid di dalam kulit akar sirgunggu bekerja secara aktif sebagai surfaktan alami yang memutus jembatan disulfida pada kompleks mukoprotein dan mukopolisakarida yang menyusun kekentalan sputum. Putusnya ikatan ini menurunkan viskositas sputum secara drastis, sehingga Mtb yang sebelumnya terperangkap dapat terlepas dan menyebar secara lebih optimal. Analisis statistik menggunakan Uji Mann-Whitney U (p = 0,4432 > 0,05) membuktikan bahwa perbedaan hasil antara EEKAS 5% dan 10% tidaklah signifikan, mengindikasikan bahwa bioaktivitas ekstrak telah mencapai titik jenuh (saturation point) pada konsentrasi 5%. Dengan demikian, penggunaan dosis EEKAS 5% merupakan konsentrasi paling optimal, efisien, dan ekonomis untuk diterapkan di laboratorium kesehatan.

Keunggulan metode ini dikupas tuntas dalam konklusi risetnya. Pertama, EEKAS memaksimalkan kualitas sediaan (smear quality); sputum yang encer menghasilkan ketebalan apusan yang sangat merata. Kedua, berbeda dengan senyawa kimia keras seperti NALC atau DTT yang dapat melisiskan dinding Mtb jika paparannya terlalu lama, EEKAS terbukti aman, murni berfokus pada pengenceran matriks sputum, dan tidak merusak lapisan esensial asam mikolat bakteri, sehingga pengikatan Carbol Fuchsin tetap kuat. Ketiga, lapis tipis apusan menciptakan kontras latar belakang (biru jernih) yang jauh lebih bersih, memudahkan mikroskopis menemukan batang merah Mtb yang kini tersebar secara individual dan merata tanpa terjadi penumpukan bakteri. Keberhasilan penelitian ini merepresentasikan sebuah lompatan besar bagi tenaga Teknologi Laboratorium Medis (TLM) dan program pengendalian TB secara nasional, mengawinkan kekayaan biodiversitas dan etnofarmakologi lokal dengan pemecahan masalah kesehatan global yang nyata.